技術文章 / article
組織蛋白酶K試劑盒在骨質疏松發(fā)揮的作用
2015-03-12 瀏覽次數(shù)：1845
一.組織蛋白酶K試劑盒簡介：
定量測定人血清或細胞培養(yǎng)上清液中由破骨細胞分泌出的組織蛋白酶K。組織蛋白酶K降解骨膠原基質，是zui豐富的活化和吸收破骨細胞的合成蛋白，也是吸收活性的特異性標志物。蛋白酶K在組織溶解、重建和骨膠原降解中具有重要作用。組織蛋白酶K在不同物種間的高同源性(小鼠86%，大鼠88%，豬97%，兔96%)，因此試劑盒也能用于動物模型的研究。
二.組織蛋白酶K試劑盒臨床應用：
- 骨轉換研究
- 惡性骨疾病
- 應用于腫瘤學
- 監(jiān)測骨吸收藥物的療效
- 預防糖皮質激素誘導的骨質疏松
- 預防原發(fā)性和繼發(fā)性骨質疏松
- 監(jiān)測作用于骨骼多個區(qū)域的炎癥疾病
- 監(jiān)控治療如激素替代治療，雙膦酸鹽治療
- 監(jiān)測風濕性骨關節(jié)炎和骨關節(jié)炎的治療療效
- 蛋白酶k與骨關節(jié)炎軟骨退變關系密切，特別在早期發(fā)病中有重要作用
三.組織蛋白酶K試劑盒樣本制備：
1. 病人在平臥安靜狀態(tài)下進行靜脈取血。采血量一般為2-3 ml。
2. 分析標本可以是血清，或是細胞培養(yǎng)清液。
3. 室溫下，90分鐘內離心分離并分析標本。建議的離心分離條件是：4°C下2000轉離心15分鐘。
4. 在4°C標本可以保存2天。
5. 若長時間保存標本，可在-20°C 下或在-70°C的條件下存放。zui多進行4次解凍。
血脂標本或溶血標本會引起結果錯誤，因此，分析之前必須充分混合標本。
四.組織蛋白酶K試劑盒操作步驟：
1 沖洗緩沖液（WASHBUF）：
1. 稀釋濃縮洗液，稀釋比例為1：20，即 50 ml 洗液中加入 950 ml 蒸餾水。
2. 濃縮液中的晶體可在室溫下溶解。
3. 沖洗緩沖液在2°C - 8°C條件下穩(wěn)定，4. 在標5. 注的有效期限內都可使用。
6. 分析時只能使用稀釋后的洗液緩沖液。
3 標準液（STD）：
1. 在每個瓶中加入1ml的ASYBUF分析緩沖液；
2. 在室溫下（18-26°C）放置20分鐘；
3. 在VORTEX MIXER上充分混勻；
4. 標準液若要分幾次使用，建議分裝保存，避免冷凍－解凍過程；5. 配制好的標準液在-20°C下穩(wěn)定，可在有效期內使用；
6. 一定不要將標準液在室溫下放置
4 質控液（CTRL）：
5 在每個瓶中加入1ml的ASYBUF分析緩沖液；
6 在室溫下（18-26°C）放置20分鐘；
7 在VORTEX MIXER上充分混勻；
8 質控液若要分幾次使用，建議分裝保存，避免冷凍－解凍過程；
9 配制好的質控液在-20°C下穩(wěn)定，可在有效期內使用；
10 一定不要將質控液在室溫下放置。
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